当环境温度在20℃以上时，周氏闭壳龟能正常吃食；15-19℃时少动，有时吃食，有时停食；14℃以下停食；10℃左右冬眠；当环境温度在5℃以上时，周氏闭壳龟能正常冬眠。野生的周氏闭壳龟食性尚未有详细记录，在人工饲养条件下，周氏闭壳龟吃食瘦猪肉、鱼肉、家禽内脏、小昆虫等。未见食植物性食物。

每年春秋两季周氏闭壳龟都有发情交配行为。5月中旬，首次见雄龟追逐雌龟，追逐过程中，雄龟时而停留在雌龟前方，伸头阻止雌龟前进，若雌龟拒绝，则伸头咬雄龟头部和前腿，雌龟有时也退让躲避；若雌龟接受雄龟，则爬伏不动，雄龟从雌龟侧面或后部爬上雌龟背上交配，交配过程中，雄龟伸头张嘴。追逐现象一直持续到7月上旬；夏季高温季节未见追逐现象，9月初又有追逐现象，水温24-28℃。6月初有交配行为，每年5-8月为产卵期。每次产卵5-6枚，卵白色，椭圆形。卵的长度42-42.8毫米，直径在23.7-24.3毫米，重量在15.8-16.3克，两天内出现精斑，均为受精卵，卵浅埋于蛭石自然孵化，孵化温度在27-31℃之间，其中90%的时间孵化温度在29-30℃。孵化时间总共为72天。